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    層析冷柜是專為生化層析實驗而研制的特殊用途低溫柜,也可用于其他需要低溫環境的實驗,或用于物品冷藏。經過科學設計,冷柜總高度一般不超過2米,便于進出房間和電梯。層析冷柜主要用在生命科學研究的高校學科和科研院所,主要用來進行各種酶類,肽類,大分子,核酸等物質的生化層析分析試驗。也可用于其他需要低溫環境的實驗,或用于物品冷藏。專門為對溫度要求很高的各種應用設計,可以在箱內操作層析設備和其它簡易安裝的儀器和設備。...
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    層析冷柜的這四種層析方法一分鐘教會你

    發布日期: 2021/10/21 11:20:45
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      層析冷柜是專為生化層析實驗而研制的特殊用途低溫柜,同時也可進行其他需要低溫環境的實驗;不做實驗時則可用于物品冷藏保存。在推出的早期,主要關注于功能,對其他功能則被忽略了。隨著各領域對層析柜的需求增加,其功能也由單一功能向多功能進行發展轉變。由此給選型帶來一定難度。
      一、凝膠過濾層析
      凝膠過濾分子篩層析是利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠作為固定相,對混合物中各組分按分子大小進行分離的技術。具有分子篩作用的物質很多,如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。
      二、離子交換層析
      離子交換法是以具有離子交換性能的物質作固定相,利用它與流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的一種方法。
      1、緩沖液與pH:選擇適當的緩沖體系,起始濃度要盡可能低些(0.01-0.05M)緩沖液PH值:陽離子低于pI一個pH單位以上陰離子通常高于pI一個pH單位以上。蛋白質在不同pH下保留行為差別較大,所以許對緩沖體系和操作pH進行摸索,以得到較佳條件。
      2、離子強度;洗脫時多采用離子濃度梯度,常加NaCl,KCl,LiCl等.在不同鹽濃度(離子強度)及其不同變化率(梯度)條件下保留行為不同,需對該條件進行摸索。一般的,隨離子強度增加,蛋白質保留值減小。
      三、疏水層析
      原理:基于生物分子表面疏水性不同而達到分離的技術。疏水作用來自于分子的水化結構,高濃度鹽溶液破壞生物分子的水化結構,使蛋白質內部的疏水基團暴露于分子外表面,從而可與疏水介質結合。
      蛋白質以高濃度鹽溶液結合與柱上,以低濃度鹽溶液洗脫。生物分子表面大都有或強或弱的疏水區域,在不同環境下,與各種疏水介質產生不同強弱的結合。高離子強度可加強疏水性。跟離子交換相反,高鹽吸附,低鹽洗脫;洗脫樣品又可直接或稍加稀釋后加上其他柱,作為連接步驟的橋梁,取代鹽析沉淀技術。配體種類繁多,很難預測哪一種、哪一個條件適合,可用試盒選擇介質
      四、親和層析
      親和是利用待分離物質和它的特異性配體間具有特異的親和力,從而達到分離目的的一類特殊層析技術。親和層析純化過程簡單、迅速,且分離效率高。

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